[实验目的]
1. 认识并了解接种环、超净工作台等器具的使用方法。
2. 初步学会培养细菌的方法。
3. 观察细菌菌落的特征。
[实验原理]
用接种环在平板表面上做多次由点到线的划线稀释,可以将混杂在一起的细菌分离,获得较多独立分布的单个细菌。单个细菌在固体培养基上经过________会形成肉眼可见的菌落。不同细菌的菌落在形状、边缘、质地、颜色等方面表现出不同的特征。
[材料器具]
材料：不同的细菌菌悬液。
器具：灭菌的牛肉膏蛋白胨平板,接种环,酒精灯,超净工作台,恒温培养箱,记号笔等。
实验实施
[方法步骤]
1. 用记号笔在高温灭菌后的培养皿底部标注________等信息。
2. 将接种环放置于酒精灯火焰上灼烧至________,在________冷却接种环,待冷却后,在酒精灯火焰附近,用接种环蘸取________。

3. 在酒精灯火焰附近,左手将培养皿皿盖打开一条缝隙,右手将蘸有菌液的接种环在________表面迅速划出三至五条________,迅速盖上皿盖。
4. 再次灼烧________,待冷却后将平板旋转,从第一次划线的________开始进行第二次划线。按照图示,重复以上操作。
5. 待菌液被培养基吸收后,将平板________,放在 $ 37^{\circ}C $ 的恒温培养箱中培养 24 小时。
6. 观察菌落的大小、形状、颜色等特征。
注意事项：
1. 整个实验过程中做好安全防护,防止被细菌污染。
2. 接种环必须冷却后才能蘸取菌悬液。
3. 培养皿皿盖打开幅度不能过大,且划线操作要迅速。
4. 实验结束后要对实验器具做好灭菌,防止污染环境。
[实验现象与讨论]
1. 现象：
根据观察,完成下面表格：
|细菌名称|菌落特征|
| |大小|形状|边缘|颜色|透明程度|质地|
| | | | | | | |

2. 讨论：
(1)为什么要把接种细菌后的平板放在适宜温度下培养？
(2)实验前对平板进行灭菌处理,实验后还要对使用过的平板进行灭菌处理。两次灭菌的目的是否相同？为什么？

实验原理：繁殖（或分裂繁殖）；方法步骤1：菌种名称、日期（合理即可）；2：红热；酒精灯火焰旁；菌悬液；3：培养基；平行线；4：接种环；末端；5：倒置；讨论（1）细菌的生长繁殖需要适宜的温度，适宜温度下细菌才能正常生长繁殖形成菌落；（2）不同，实验前灭菌是为了杀死平板上原有的微生物，防止杂菌污染实验；实验后灭菌是为了杀死培养出的细菌，防止污染环境。

实验原理中，单个细菌在固体培养基上通过繁殖形成菌落；方法步骤1标注信息包括菌种、日期等；步骤2接种环灼烧至红热，在火焰旁冷却后蘸取菌悬液；步骤3在培养基表面划平行线；步骤4灼烧接种环，从第一次划线末端开始第二次划线；步骤5平板倒置培养。讨论（1）适宜温度利于细菌生长繁殖；（2）实验前灭菌防杂菌污染，实验后灭菌防环境污染，目的不同。